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微生物学 第五章 消毒与灭菌

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发表于 2022-11-7 08:00:42 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式 <
一、基本概念

1、控制害菌的措施

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2、灭菌(Sterilization)

用理化方法杀死包括芽孢在内的所有微生物,被处理后的物品呈无菌状态。
3、消毒(Disinfection)

用理化方法杀死或灭活病原微生物,以防止传染病传播。一般只杀死营养体细胞,不能杀死芽孢。
4、防腐(Antisepsis)

防止或抑制霉腐微生物在食品等物质上的生长;以防止物品腐败霉变。
5、化疗(Chemotherapy)

杀死或抑制宿主体内的病原微生物;
6、死亡(Death)

生长能力不可逆丧失
7、抑制(Inhibition)

生长停止,但不死亡
8、理化因子抑菌还是杀菌作用的相关因素

①理化因子的性质、强度或浓度
②同一浓度理化因子作用时间的长短
③不同种类的微生物及数量
④同种微生物的不同生长时期
二、控制微生物的物理因素——物理方法

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1、温度

当温度超过微生物生长的最高温度或低于生长的最低温度都会对微生物产生杀灭作用或抑制作用。
①影响热力灭菌的因素­——温度
(1)高温: 使蛋白质、核酸等重要生物大分子发生变性、破坏,以及破坏细胞膜上的类脂成分,导致微生物死亡。
(2)低温: 使菌体代谢缓慢、停滞,主要起抑菌作用,用于菌种保藏。
②热力灭菌法
(1)干热灭菌(Dry heat sterilization)
干烤法:烘箱内热空气灭菌160℃,2小时
火焰灼烧/焚烧灭菌:破坏力强,使用有限。
(2)湿热灭菌 (Moist heat sterilization)
同一温度相同时间下,湿热比干热灭菌更好
a.蒸汽的穿透力比干热空气强,更易于传递热量
b.蛋白质吸收水分后更易变性凝固,保持其稳定性的氢键等结构更易破坏
c.蒸汽与物品表面接触后凝结成水放出潜热,使物品温度迅速升高,加速微生物死亡。
湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件:
多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5-10分钟;
酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上温度处理;
细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上
a.巴氏消毒法/巴斯德消毒(Pasteurization)
60-85℃处理15秒至30分钟
b.煮沸消毒(boiling)
c.间歇灭菌(fractional sterilization OR tyndallization)
d.常规高压灭菌(autoclaving)
103.5kPa,121℃,15~30分钟;
含糖:55.2~68.9kPa,113~115℃,15~30分钟;
e.连续加压灭菌(continuous autoclaving)(超高温灭菌)
135-150℃,5-15秒,工业上发酵培养基
135-150℃,2-6秒,牛奶或其它液态食品
③影响高压蒸汽灭菌效果的因素
(1)灭菌物体的含菌种类与数量
(2)灭菌锅内的空气排除程度
(3)灭菌对象的pH
(4)灭菌对象的体积
(5)温度与作用时间
2、辐射——紫外线

(波长在200-300nm时有杀菌作用,其中265-266nm波长的紫外线杀菌力最强)
辐射灭菌(Radiation Sterilization)是利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法。
①杀菌原理:
细胞中核酸、碱基和蛋白质能吸收紫外线且改变本身结构波长在265nm时核酸有最大吸收峰,主要引起DNA一条链或两条链上相邻的胸腺嘧啶之间形成二聚体,干扰其复制。轻则突变,重则致死。
②使用的注意事项:
(1)避免光复活现象(Photoreactivation)。
(2)因紫外线穿透力差,只适用于物品表面及空气消毒。
(3)紫外线对皮肤、眼结膜有损伤,要注意防护。
3、过滤作用

过滤除菌是利用滤器机械地滤除液体或空气中的细菌的方法。
适用空气和不耐热的液体培养基的灭菌
三、控制微生物的化学物质——化学方法

1、抗微生物剂(Antimicrobial agent)

包括生物合成的天然产物与人工合成的化合物,是一类能够杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质
2、化学物质的抗微生物能力的测定


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②缺点:对杀菌(MBC)或抑菌(MIC)作用无法区分
3、抗微生物剂种类

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①防腐剂和消毒剂
特点:对一切活细胞都有毒性,不能用于人或动物体内的化学治疗。
(1)消毒剂:可杀灭病原微生物,通常用于非生物材料的灭菌或消毒。
(2)防腐剂:能防止或抑制微生物生长繁殖,但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低,可作为外用抗微生物药物。
(3)化学治疗剂;能杀灭或抑制机体内病原微生物,用于临床治疗的化学药物。包括磺胺、抗生素等
(4)在临床上最早使用的消毒剂----石炭酸
各种抗微生物化学制剂杀菌能力的比较标准:石炭酸系数:指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟,而供试菌定为Salmonella typhi(伤寒沙门氏菌)。
(5)影响消毒剂作用的因素
a.消毒剂的性质和作用方式
b.微生物种类
c.消毒剂的浓度和作用时间
d.环境因素:温度,pH,有机物的存在等
②抗代谢物
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(1)概念:有些化合物在结构上与细胞内所必需的代谢物很相似,以至可以和特定的酶结合,从而阻碍了酶的功能,干扰了代谢的正常进行,这些物质称为抗代谢物(Antimetabolite)。
(2)叶酸对抗物(磺胺)
磺胺药物是最早发现,也是最常见的化学疗剂,抗菌谱广,能治疗多种传染性疾病。
磺胺的抑菌作用是因为很多细菌需要自己合成叶酸而生长。
磺胺对人体细胞无毒性,因为人缺乏从对氨基苯甲酸合成叶酸的相关酶——二氢叶酸合成酶,不能用外界提供的对氨基苯甲酸自行合成叶酸,而必须直接利用叶酸为生长因子进行生长。



来源:https://www.bilibili.com/read/cv14420639
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